什么是透析袋,又有什么作用?
透析袋通常是由半透膜制成的袋狀容器。在生物大分子的制備過程中,除去鹽、少量有機溶劑、生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品時都要用到透析的技術-透析袋。
透析袋采用生物技術,級纖維素酯膜純度高,并具有生物惰性。有多種截留分子量,以用于脫鹽、藥物釋放、和生物大分子純化等不同需要。生物技術級CE膜對實驗條件和溶劑較為敏感,通??赡褪苋跛峄蛉鯄A、稀釋了的強酸或強堿、以及溫和的低碳醇。在這些情況下,膜孔徑分布僅有微小變化。大部分有機溶劑可能會破壞CE膜。生物技術級CE膜適用于pH2-9,溫度4-37°C。生物技術級CE膜管有10米長的膜卷和1米長的透析試驗包兩種包裝規(guī)格。
而透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內(nèi),將此透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內(nèi),而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴散透析到袋外,直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為"保留液",袋(膜)外的溶液稱為"滲出液"或"透析液"。
透析的動力是擴散壓,擴散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。
透析膜可用動物膜和玻璃紙等,但用的多的還是用纖維素制成的透析膜,目前常用的是美國SPECTRUM公司生產(chǎn)的各種尺寸的透析管,截留分子量MwCO(即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的小分子量,縮寫為MwCO)通常為1萬左右。